酶標儀(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)是一種常用的生物化學分析方法,用于檢測和定量分析樣品中特定物質(zhì)的存在和濃度。下面是酶標儀的使用方法的一般步驟:

1. 準備樣品和試劑:收集樣品并進行必要的預(yù)處理,如稀釋、提取、去除雜質(zhì)等。同時準備好所需的試劑,包括酶標板、酶標抗體、底物、洗滌緩沖液等。
2. 酶標板涂層:將目標抗原或抗體溶液加入酶標板孔中,使其吸附在孔底,形成固相。通常需要將酶標板放置在4°C的冰箱中一定時間,使抗原或抗體充分與酶標板結(jié)合。
3. 孔洗滌:在每個孔中添加洗滌緩沖液,將其倒出,重復(fù)該步驟多次,以去除未結(jié)合的抗原或抗體,減少非特異性背景信號。
4. 樣品加入:將樣品加入酶標板的相應(yīng)孔中,通常有標準曲線樣品和待測樣品。樣品可以是血清、尿液、細胞上清等,可以通過稀釋將其加入孔中。
5. 反應(yīng)孔孵育:將酶標板封閉,并將其放入恒溫箱或酶標儀中孵育一定時間,使抗原或抗體與樣品中的目標物質(zhì)結(jié)合。
6. 洗滌:使用洗滌緩沖液洗滌酶標板,去除未結(jié)合的物質(zhì)。
7. 酶標抗體加入:將酶標抗體溶液加入酶標板的相應(yīng)孔中,使其與樣品中的目標物質(zhì)結(jié)合。
8. 反應(yīng)孔孵育:將酶標板封閉,并將其放入恒溫箱或酶標儀中孵育一定時間,使酶標抗體與目標物質(zhì)結(jié)合。
9. 洗滌:使用洗滌緩沖液洗滌酶標板,去除未結(jié)合的物質(zhì)。
10. 底物加入:向每個孔中加入底物,底物