自七十年代酶標(biāo)法提出以來，經(jīng)過不斷地發(fā)展現(xiàn)已成為檢驗(yàn)?zāi)承┲笜?biāo)的主要方法，與此同時(shí)，作為專用于微孔板比色的酶標(biāo)儀也獲得了很大的發(fā)展。

    1、酶標(biāo)儀在血液檢驗(yàn)上的應(yīng)用

    目前在國內(nèi)血站臨床試驗(yàn)室中，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)已成為*主要的免疫測定技術(shù)，由于大部分ELISA*后以比色測定，使酶標(biāo)儀成其它各類型酶標(biāo)儀為ELISA測定的重要工具。八十年代初，當(dāng)酶免疫測定技術(shù)從國外引進(jìn)時(shí)，基本上均使用肉眼判斷結(jié)果，難以滿足臨床測定要求。目前國內(nèi)醫(yī)院和血站實(shí)驗(yàn)室所使用的酶標(biāo)儀絕大部分為進(jìn)口儀器，品種型號多達(dá)數(shù)十種。

    軟件功能是酶標(biāo)儀所具有的對 ELISA定性和定量測定及其他測定方式如酶動(dòng)力學(xué)、紫外、凝集等的統(tǒng)計(jì)分析并報(bào)告結(jié)果的功能，是判斷酶標(biāo)儀質(zhì)量的一個(gè)指標(biāo)。ELISA 測定，酶標(biāo)儀需具有陽性判斷值(Cutoff)及測定灰區(qū)的統(tǒng)計(jì)計(jì)算功能，如血站實(shí)驗(yàn)室篩選獻(xiàn)血員進(jìn)行抗 - HCV、HBSAG、抗 - HIV 測定時(shí)，常遇到測定吸光度處于Cutoff 附近，但又低于Cutoff 的樣品，這樣的血輸給患者導(dǎo)致輸血后傳染疾病的可能性增大。若設(shè)定灰區(qū)，以灰區(qū)下限作為判斷標(biāo)準(zhǔn)，可減少輸血后傳染疾病的可能性。此外四參數(shù)測定的劑量反應(yīng)曲線適合于定量酶免疫測定曲線的擬合。因此，如果目的為定量測定，要有這種曲線回歸方程計(jì)算分析功能。其他如連點(diǎn)、直線等回歸計(jì)算，可根據(jù)酶標(biāo)儀的應(yīng)用目的而定。

    丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)的測定，是對獻(xiàn)血者不可缺少的篩查項(xiàng)目之一。方法上有速率法和賴氏法等。若采用賴氏試管法，費(fèi)工、費(fèi)時(shí)，不但從方法上得不到統(tǒng)一，而且不利于計(jì)算機(jī)對原始數(shù)據(jù)的網(wǎng)絡(luò)化管理。若采用微板酶標(biāo)儀定量(U/L)方法，利用酶標(biāo)儀與計(jì)算機(jī)接口，聯(lián)接血站局域網(wǎng)絡(luò)，這就同其他酶法檢測項(xiàng)目一樣，實(shí)現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)室原始數(shù)據(jù)的計(jì)算機(jī)管理。

    采用試管法檢測Rh血型，操作繁鎖，肉眼判讀結(jié)果缺乏客觀性。故將平底微板法與酶標(biāo)儀掃描，電腦自動(dòng)判讀打印技術(shù)相結(jié)合，用TCEAN全自動(dòng)加樣分析系統(tǒng)完成。經(jīng)常規(guī)13032份標(biāo)本的檢測，符合率達(dá)****。利用酶標(biāo)儀法檢測Rh血型具有較好的重復(fù)性、準(zhǔn)確性，操作簡便快速、判讀結(jié)果客觀可靠，也易于原始結(jié)果的保存，提高自動(dòng)化程度，能高效的篩選獻(xiàn)血者，有利于實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)化管理，也有利于血站稀有血型庫的建立。

    2、酶標(biāo)儀在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用

    在自然界中，無論是脊椎動(dòng)物還是無脊椎動(dòng)物(包括昆蟲)、植物或微生物，酚氧化酶在其生命過程中都發(fā)揮著重要作用。在昆蟲體內(nèi)，它對昆蟲的變態(tài)發(fā)育和免疫系統(tǒng)起著重要作用。酚氧化酶催化完成的“醌鞣化”作用可以促進(jìn)昆蟲表皮的硬化與黑化，這個(gè)過程對于具有“外骨骼”的昆蟲生命過程至關(guān)重要。因此酚氧化酶抑制劑的研究正是為當(dāng)今農(nóng)藥的發(fā)展提供了重要線索。那么采用何種高效、簡便的的方法來研究酚氧化酶抑制劑對酚氧化酶的影響?我們可以運(yùn)用酶標(biāo)儀微量法來進(jìn)行這方面的研究。例如以LDOPA 為底物，采用酶標(biāo)儀微量法研究了化合物2-羥基-4-甲氧基苯甲醛縮苯胺對酚氧化酶的影響。利用酶標(biāo)儀旨在為酚氧化酶研究提供更便捷的方法，也為開發(fā)以該酶為靶標(biāo)的新型害蟲控制劑提供理論依據(jù)。

    3、酶標(biāo)儀在食品安全方面的應(yīng)用

    伏馬菌素是*近發(fā)現(xiàn)的一族主要由幾種真菌產(chǎn)生的結(jié)構(gòu)相關(guān)的毒素代謝產(chǎn)物，主要包括FB1，F(xiàn)B2和FB3。FI能引起馬腦白質(zhì)軟化癥，豬肺水腫及大鼠腎及肝癌。流行病學(xué)研究顯示部分地區(qū)食道癌的高發(fā)率與玉米中含伏馬菌素(1.0-2.0mg/kg)有關(guān)。毒物學(xué)研究表明少量的FB2和FB3的潛在的致癌作用與FBl類似。國際癌癥研究機(jī)構(gòu)與加利福尼亞環(huán)境保護(hù)機(jī)構(gòu)已宣布伏馬菌素為人類潛在的致癌物質(zhì)。該毒素已被世界衛(wèi)生組織列為近年來首先進(jìn)行研究的幾種霉菌毒素之一。因此快速、高效的檢測伏馬菌素便顯得尤為重要，應(yīng)用固相直接競爭酶聯(lián)免疫吸附原理，用70%甲醇從研磨樣品中提取伏馬菌素。萃取出的樣品液與酶標(biāo)記的伏馬菌素混合加入到抗體包被的微孔中，樣品及標(biāo)準(zhǔn)品中的伏馬菌素與酶聯(lián)偶合劑競爭結(jié)合孔中的特異抗體。經(jīng)過洗滌步驟后，當(dāng)酶的底物被加入到微孔中，顏色變?yōu)樗{(lán)色，且顏色深淺與樣品中伏馬菌素含量成反比。加入反應(yīng)終止液終止反應(yīng)后，顏色應(yīng)由藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色。在450nm或630nm的濾鏡下使用酶標(biāo)儀對微孔板進(jìn)行光學(xué)測量。將樣品與標(biāo)準(zhǔn)品的光密度值進(jìn)行比較后確定得出的結(jié)果。

    4、酶標(biāo)儀在微生物學(xué)的應(yīng)用

    生長曲線一般指菌落總數(shù)CFU/mI?；蛘呔淇倲?shù)的對數(shù)log CFU/ml。隨時(shí)間變化曲線，可用來展示微生物生長情況和新陳代謝規(guī)律。由于受試菌數(shù)量/濃度與菌懸液的光學(xué)密度(optical density，OD)值成正比，所以生長曲線也常用OD-t曲線表示。目前菌懸液OD值主要通過可見分光光度計(jì)測定，其在評價(jià)微生物生長狀態(tài)時(shí)可以得到滿意的結(jié)果。但是該方法存在一定缺點(diǎn)：即時(shí)性差;需反復(fù)采樣，操作繁瑣;取樣和檢測過程中培養(yǎng)基容易感染雜菌;作為懸濁液，細(xì)菌有一定的沉降速率，檢測時(shí)間的長短會(huì)對OD值產(chǎn)生影響，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)再現(xiàn)較為困難。由于酶標(biāo)儀是一種快速、準(zhǔn)確、高通量的儀器，所以我們總會(huì)選擇使用酶標(biāo)儀來進(jìn)行菌懸液OD值的測定，來提高工作效率，節(jié)約時(shí)間。

    除測定菌懸液OD值外，酶標(biāo)儀還可用來檢測細(xì)菌濃度。例如：各類紡織品與人類生活關(guān)系密切，其表面附著的微生物可能是疾病傳播的重要媒介或與體表微生物相伴形成一種有機(jī)的微生態(tài)關(guān)系。隨著時(shí)代的發(fā)展，各種抗菌織物產(chǎn)品不斷出現(xiàn)，但對評價(jià)抗菌紡織品的

    抑菌效果尚無規(guī)范的方法，所以，建立一種科學(xué)評價(jià)織品抗菌效果的方法對衛(wèi)生微生物學(xué)和微生態(tài)學(xué)研究均具有重要價(jià)值。由于活菌計(jì)數(shù)誤差較大而且工作繁瑣，不適用于大批量標(biāo)本的檢測，因而利用酶標(biāo)儀檢測細(xì)菌濃度便可建立檢測織品抑菌效果的有效方法。

    5、酶標(biāo)儀室內(nèi)質(zhì)量控制

    酶標(biāo)儀是臨床檢驗(yàn)科和血站常用的免疫學(xué)檢測儀器之一，它通過吸光度測定，對被檢標(biāo)本作出定性或定量報(bào)告，但影響其測定結(jié)果的因素較多，而現(xiàn)有的血清學(xué)質(zhì)控方法是對免疫學(xué)檢驗(yàn)的全過程進(jìn)行質(zhì)量控制，包括加樣、保溫、洗滌、顯色、終止和比色等步驟，一旦出現(xiàn)失控，很難判斷是試劑的原因、儀器的原因或是操作人員本身的因素，為了明確地了解儀器的工作狀態(tài)，我們建立了一種酶標(biāo)儀室內(nèi)質(zhì)量控制方法。如這種簡單的酶標(biāo)儀室內(nèi)質(zhì)量控制方法，它采用甲基橙溶液作為質(zhì)控物，用質(zhì)控圖法對酶標(biāo)儀492nm波長進(jìn)行質(zhì)控，其結(jié)果不受免疫檢驗(yàn)過程中加樣、保溫、洗滌、顯色、終止和比色等步驟的影響，可直接反映儀器本身的性能，方法簡單、效果良好。